DynaPro NanoStar II
Il DynaPro NanoStar II è utilizzato per eseguire misure di Dynamic Light Scattering (DLS) e SLS (Static Light Scattering) per la caratterizzazione di proteine in soluzione, inibitori, anticorpi, micelle, quantum dot, liposomi, nanoparticelle metalliche, ecc. La micro cuvetta in quarzo da 1 µL, che utilizza il Nanostar permette di analizzare campioni molto preziosi e disponibili in quantità limitate. E’ disponibile anche una cuvetta usa e getta da 4 µL che garantisce una elevata sensibilità.
Il NanoStar è fornito con il software proprietario DYNAMICS, pacchetto software estremamente potente per l’acquisizione e l’analisi di dati in DLS.
Insieme al software DYNAMICS, il NanoStar è utilizzato per eseguire non solo la misura delle dimensioni, e peso molecolare o della loro distribuzione, ma anche altre proprietà estremamente rilevanti per la stabilità in soluzione: quali il secondo coefficiente del viriale (A2 or B22), il parametro di diffusione (kD or D1, strettamente collegato al coefficiente del viriale), e la Temperatura alla quale la proteina denatura o aggrega (TM, Tonset).
Cuvette e non solo…
... Altra caratteristica unica del NanoStar è che la fibra ottica può essere scollegata dall’alloggiamento in cella e collegata ad uno qualsiasi dei vari rivelatori Mals della Wyatt, il DAWN o miniDAWN – per aggiungere la misura DLS on line alla classica misura di Light Scattering statico, con il vantaggio di misurare parametri diversi nello stesso volume di scattering,.
Combinando tutti questi benefici il NanoStar può essere considerato come uno dei migliori strumenti per DLS presentì sul mercato. Se è necessario avere una alta produttività, mantenendo le stesse prestazioni, vale la pena considerare il DynaPro Plate Reader III, il solo sistema per misure DLS disponibile sul mercato che lavora con micro piastre standard e che permette di eseguire misure DLS dello stesso campione in condizioni di solvente diverse.
Principali Caratteristiche
- Rh da 0.18 nm - 2500 nm
- Temperatura da -10°C a +120°C
- Peso Molecolare da 300 Da a 1 MDa
- Rivelatore DLS e SLS separati ed indipendenti
- Auto-attenuazione fino a cinque ordini di grandezza
Versatilità
La misura è condotta in micro cuvetta di quarzo di altissima qualità, con un volume di 2 µL di campione richiesto, utilizzabile con solventi acquosi ed organici. Questa cuvetta di aggiungere un solvente, anche immiscibile con il campione per prevenire l’eventuale evaporazione se si lavora ad alte temperature o per tempi molto lunghi. La nostra cuvetta disposable invece, fornisce una accuratezza di misura molto vicina a quella del quarzo e richiede solo 4 µL di campione acquoso, è utilizzabile anche con alcune solventi organici. A richiesta sono disponibili cuvette in quarzo o disposable con volumi più alti.
Misure On Line
MALS e DLS on line nella stessa cella
La determinazione simultanea di massa molecolare e dimensioni è cruciale per lo studio strutturale e conformazionale di macromolecole, (ad esempio determinazione del rapporto di ramificazione di polimeri, discriminate tra vescicole piene o vuote, ecc). Per molecole di piccole dimensioni quali le proteine, il MALS non può misurare la dimensione direttamente mediante la misura della dipendenza angolare della luce diffusa, pertanto il DLS è una importante tecnica complementare.
La misura DLS on line mediante SEC-MALS o FFF-MALS permette di misurare il Raggio Idrodinamico che, in combinato con il Raggio di Girazione fornito dal Mals, permette di calcolare il cosiddetto fattore di forma, (rg:Rh) di grosse nanoparticelle. La soluzione proposta da Wyatt consente quindi di eseguire la doppia misura Rg (dal Mals) e Rh (dal DLS) nella cella del Mals, senza dover aggiungere un ulteriore rivelatore in linea con i problemi ad esso associati, allargamento di banda, ulteriore diluizione, dover allineare i segnali e perdita di risoluzione.
NanoStar può essere accoppiato alla cella da flusso del Mals, semplicemente con un fiber coupling accessory. Il software cromatografico ASTRA collegato al rivelatore Mals e DLS acquisisce I dati simultaneamente da entrambi, ed esegue l’analisi fornendo un rapporto dove sono riportate le single informazioni (Peso molecolare, raggio di girazione e raggio idrodinamico) ed i risultati derivanti dalla loro combinazione quali la configurazione mediante il calcolo del fattore di forma.
Software
DYNAMICS – Software di acquisizione ed analisi di dati DLS. Utilizzato con il Nanostar acquisisce ed analizza i dati per determinare la dimensione e la distribuzione di Rh, gestisce le rampe di temperatura per determinare la temperature di denaturazione, di aggregazione ed il parametro di diffusione kD. Con il Plate Reader alle funzioni già dette è aggiunta l’automatizzazione delle scansioni nella micro piastra.
